PHƯƠNG PHÁP THẨM ĐỊNH NĂNG LỰC NỒI HẤP TIỆT TRÙNG
I. NGUYÊN TẮC:
- Thực hiện quá trình hấp tiệt trùng dung dịch vi khuẩn đã tăng sinh đến nồng độ 106 CFU/ml trong điều kiện (121 0C, trpng 15 phút), sau đó đem ủ dung dịch vi sinh vật sau khi hấp ở điều khiện môi trường tăng sinh, nếu vi sinh vật chỉ thị không xuất hiện thì quá trình tuyệt khuẩn có hiệu lực, ngược lại không hiệu lực.
II. Thực hiện:
- Vi sinh vật chỉ thị:
- Theo TCVN 9855-3:2013 (ISO 11138-3:2006) – Tiệt khuẩn sản phẩm chăm sóc sức khỏe – chất chỉ thị sinh học – Phần 3: Chất chỉ thị sinh học cho quá trình tiệt khuẩn bằng nhiệt ẩm, vi sinh vật chỉ thị nhiệt ướt là chủng Geobacillus stearothermophilus (Donk) Nazina et al – ATCC® 7953™ hoặc chủng Bacillus subtilisATCC 35021 (5230)
- Theo dược điển Việt Nam 5 thì sử dụng Bacillus stearothermophilus (hay còn gọi là Geobacillus stearothermophilus).
- Ghi chú:
+ Tham khảo thêm bộ tiêu chuẩn TCVN 9855:2013 (ISO 11138:2006)
+ Ngoài ra, bạn có thể sử dụng bộ kit thương mại trên thị trường, có hướng dẫn sử dụng rõ ràng.
+ Chủng vi sinh vật xem trang: https://www.atcc.org/products/all/7953.aspx#generalinformation
- Môi trường nuôi cấy:
Giữ giống theo hướng dẫn nhà cung cấp
Sử dụng môi trường Medium Nutrient để tăng sinh vi sinh vật chỉ thị.
- Beef Extract……………………..…………..3.0 g
- Peptone……..…………………….…………5.0 g
- Nước …………………………………..….1000 ml
- Final pH 6.8 +/- 0.2.
- Phân phối vào bình tam giác 250 ml, mỗi bình khoản 60 ml dung dịch (mỗi mẫu 3 bình).
- Autoclave at 1210C trong 15 phút
- Chuẩn vị dung dịch vi sinh vật chỉ thị
Cấy vi sinh vật chỉ chỉ vào môi trường medium Nutrien, sau đó ủ nhiệt độ phù họp cho sử phát triển trong vòng 48 giờ khoặc đến khi nồng độ vi sinh vật đạt 5 X 105 – 106 CFU/ml.
Điểu kiện nhiệt độ thích hợp như sau:
- Geobacillus stearothermophilus nhiệt độ thích hợp 55°C
- Bacillus subtilis nhiệt độ thích hợp 30°C đến 40°C (tối thích khoản 37 °C)
- Thực hiện thẩm định
4.1 Thẩm định vật lý:
- Bạn thực hiện kiểm định an toàn thiết bị của bạn định kỳ hàng năm theo thiết bị yên cầu nghiêm ngặt về an toàn;
- Kiểm định độ đúng của đồng hồ chỉ thị nhiệt, áp.
4.2. Thẩm định khả năng tiệt trùng
- Tiến hành cho củng đã cấy vi sinh vật chỉ thị chuẩn bị ở trên tiến hành hấp tiệt trùng ở 121 0C trong vòng 15 phút.
- Sau khi hấp xong tiến hành ủ vi sinh vật ở nhiệt độ thích hợp (xem mục 3) trong 24 giờ.
- Sau đó đọc kết quả, nếu vi sinh vật chết, nồi hấp bạn có đủ năng lực, nếu vi sinh vật bạn còn sống thì nồi hấp bạn không có hiệu lực. Trường hợp thiết bị bạn không có hiệu lực bạn nên thuê bên ngoài thẩm định lại chương trình nhiệt của nồi, sau thử thẩm định lại năng lực khử khử trùng của nồi.
- Đối với bạn áp dụng ISO 13485 hoặc GMP WHO thì bạn thực hiện thẩm định vi sinh theo hướng dẫn TCVN 9855:2013 (ISO 11138:2006), Bộ tiêu chuẩn ISO 11138 Sterilization of health care products — Biological indicators, , Bộ tiêu chuẩn ISO 11140, Sterilization of health care products — Chemical indicators.
4.3 Chu kỳ thẩm định:
- Định kỳ 1 năm 1 lần
————————————————————————
P/S Nếu bạn thấy bài viết này có ích cho bạn và người khác, hãy giúp tôi chia sẽ cho những người khác biết. Nếu bài viết chưa tốt vui lòng email cho tôi theo địa chỉ nguyenhoangem@gmail.com để chúng tôi hoàn thiện lại (vì số lượng bài viết ngày càng nhiều nên bạn comment bên dưới tôi không có thời gian đọc hết lại các bài viết nên không phát hiện được khi bạn comment và trả lời kịp thời). Cám ơn bạn rất nhiều!
Nguyễn Hoàng Em